Продукциялар

Белоктун фосфорлануусу ар түрдүү клеткалардын функцияларын жөнгө салат жана өсүмдүктөрдүн алгачкы өнүгүүсүндө негизги ролду ойнойт.Арабидопсис көчөттөрүндөгү протеиндин фосфорлануусу боюнча мурунку изилдөөлөрдү толуктоо жана кеңейтүү үчүн биз денатурацияланбаган шарттарда протеинди экстракциялоону иммобилизацияланган металл-ионго жакындык хроматографиясы (IMAC) менен Рубиско-жок болгон экстракттарда бузулбаган фосфопротеиндерди байытууну айкалыштырган альтернативалуу ыкманы колдондук. эки өлчөмдүү гел электрофорез (2-DE) жана суюк хроматография-тандем масс-спектрометрия (LC-MS/MS) колдонуу.Гель ичиндеги трипсинди сиңирүү жана тандалган гел тактарынын анализи 144 фосфорланган пептиддерди жана калдыктарды аныктады, анын ичинен PhosPhAt 4.0 жана P3DB Arabidopsis thaliana фосфорлануу сайттарында 18 фосфопептид жана 8 фосфозит гана табылган.82 аныкталган phosphoproteins жарымынан көбү карбонгидрат алмашуу, фотосинтез / дем алуу же кычкылдануу стресс жооп механикалык смс тартылган.2-DE жана LC-MS/MS чейин бузулбаган фосфопротеиндерди байытуу, пептиддик деңгээлдеги байытууну колдонгон методдор менен салыштырганда фосфорланган треонин жана тирозин калдыктарын аныктоону күчөтөт, бул эки ыкма фосфорлануу аянтынын камтуусу жагынан бир аз толуктап турат.Жаш көчөттөрдүн натыйжалары менен мурда жетилген арабидопсис жалбырактары үчүн алынган натыйжаларды салыштырып, бул ткандарда дифференциалдуу түрдө фосфорланышкан беш белок аныкталды, бул ыкманын өсүмдүктөрдүн өнүгүүсүндөгү протеин фосфорлануусунун динамикасын изилдөө үчүн потенциалын көрсөттү.