Продукциялар

Бир убактагы мутациялардын эффекттеринин биригип ферменттик активдүүлүктү өзгөртүү ыкмасын алдын ала айтуу оңой эмес, анткени бул эффекттер дайыма эле сызыктуу түрдө кошумча боло бербейт.Демек, субстратты байланыштырган аминокислота калдыктарынын бир мезгилдеги мутацияларынын таасиринин мүнөздөмөсү ферменттердин субстраттык өзгөчөлүгүн түшүнүүгө олуттуу салым кошо алат.Spodoptera frugiperda (Sfbetagly) бета-гликозидазасында Q39 жана E451 калдыктары тең субстрат менен өз ара аракеттенишет жана бул субстраттын өзгөчөлүгүн аныктоо үчүн абдан маанилүү.Сфбетаглинин кош мутанттары (A451E39, S451E39 жана S451N39) сайтка багытталган мутагенез аркылуу даярдалган, бактерияларда экспрессияланган жана жакындык хроматографиясы аркылуу тазаланган.Бул ферменттер субстрат катары p-nitrophenyl бета-галактозид жана p-nitrophenyl бета-фукозидди колдонуу менен мүнөздөлгөн.Q39 жана E451 позицияларындагы сайтка багытталган мутацияларды камтыган Sfbetagly бир жана кош мутанттары үчүн k cat/Km катышы кош мутациялардын (Gdouble) ESdouble канжарынын (фермент өтүү абалынын комплексинин) бош энергиясына тийгизген таасирин көрсөтүү үчүн колдонулган. daggerxy) жалгыз мутациялардан келип чыккан эффекттердин суммасы эмес (Gdouble daggerx жана Gdouble daggery).Gdouble канжарындагы бул айырма жалгыз мутациялардын таасирлеринин жарым-жартылай дал келерин көрсөтүп турат.Демек, бул жалпы эффект Gdouble канжарында бир гана жолу эсептелет.Бета-гликозидазалар боюнча кристаллографиялык маалыматтар Q39 жана E451 калдыктарын жана субстраттын ошол эле гидроксил тобун камтыган биденттүү суутек байланышынын бар экендигин аныктайт.Демек, термодинамикалык да, кристаллографиялык да маалыматтар Q39 жана E451 калдыктары субстрат менен тиешелүү өз ара аракеттенүүсүнө өз ара таасирин тийгизет деп болжолдойт.