Продукциялар

ДНК негиздеринин кычкылдануу бузулушу көбүнчө кычкылданган пуриндердин, атап айтканда 7,8-дигидро-8-оксогуаниндин (8-оксоГ) жана 7,8-дигидро-8-оксоадениндин (8-оксоА) пайда болушуна алып келет. белгилүү мутагендик жабыркоо.8-oxoG кадимки негиздерге салыштырмалуу андан ары кычкылданууга оңой дуушар болгондуктан, ДНК синтези учурунда 8-oxoG кычкылданган түрүнө карама-каршы келген базанын кириши in vitro изилденген.Жалгыз 8-oxoG жарасын камтыган синтетикалык шаблон адегенде ар кандай бир-электрондук кычкылдантуучулар менен же синглет кычкылтек шарттарында дарыланып, андан кийин Кленов фрагменти экзо- (Kf экзо-), музоо тимусунун ДНК полимераза альфа (pol alpha) менен катализделген праймердин узартылышына дуушар болгон. ) же адамдын ДНК полимераза бета (пол бета).Мурунку отчетторго ылайык, dAMP жана dCMP бардык үч ДНК полимеразалары менен 8-oxoGге карама-каршы тандалып киргизилет.Кызыктуусу, 8-oxoG кычкылдануусу өзгөртүлгөн базанын сайтында пайда болгон праймердин кеңейүүсүнө убактылуу бөгөт коюу менен Kf exo- тарабынан жарага карама-каршы келген dAMP жана dGMP киргизүүнү шарттаганы аныкталган.Мындан тышкары, жабыркашы пол альфа жана пол бета менен ДНК синтези учурунда блокту түзөт.8-oxoA-модификацияланган шаблон олигонуклеотид менен болгон эксперименттер 8-oxoA да, кычкылданган 8-оксоАнын кычкылданган түрү да Kf экзо- менен dTMP түз киришин көрсөтүп турат.IrCl62 менен кычкылданууга чейин жана андан кийин 8-оксоГ камтыган олигонуклеотиддердин массалык спектрометриялык анализи негизинен 8-оксоГ участогунун кычкылданышына шайкеш келет, натыйжада негизги продукт катары гуанидиногидантоин бөлүгү пайда болот.Абазиялык сайттардын пайда болушуна эч кандай далил алынган эмес.Бул натыйжалар 8-oxoG кычкылданган түрү, балким, guanidinohidantoin, ДНК синтези учурунда dNTPs туура эмес окууга жана туура эмес киргизүүгө алып келиши мүмкүн экенин көрсөтүп турат.Эгерде мындай процесс in vivo болгон болсо, анда ал G-->T жана G-->C трансверсияларына алып баруучу чекиттик мутагендик жабыркоону билдирет.Бирок, 8-оксоА тиешелүү кычкылданган түрү, биринчи кезекте, Kf экзо- менен ДНК синтези учурунда Т туура киргизүүнү көрсөтөт.