Продукциялар

Колицин E1 каналынын доменинин мембраналык топологиясы флуоресценттик резонанстык энергияны өткөрүү (FRET) менен изилденген.FRET донор катары генетикалык жактан коддолгон флуоресценттик аминокислота (кумарин) жана FRET кабыл алуучу катары DABMI (4-(диметиламино)фенилазофенил-4'-малейид) менен байланган тандалган цистеин калдыктары катышкан.Флуоресценттик кумарин калдыктары протеинге ортогоналдык тРНК/аминоацил-тРНК синтетаза түгөйү аркылуу кошулган, бул колицин каналынын доменинин ичиндеги каалаган сайтка тандалма кошулууга мүмкүндүк берген.Ар бир вариант кумаринди кошуу үчүн токтотуу (TAG) мутациясын жана DABMI тиркемеси үчүн цистеин (TGT) мутациясын камтыган.1-6 спиральдардын ичиндеги алты аралык аралыктар FRET анализинин жардамы менен эрүүчү жана мембрана менен байланышкан мамлекеттер үчүн аныкталган.FRET маалыматтары канал доменинин мембрана менен байланышкан структурасы жөнүндө жаңы түшүнүктү камсыз кылуучу мембрана бирикмеси боюнча 3-6 спиральдар ортосундагы аралыктардагы чоң өзгөрүүлөрдү көрсөттү.Жалпысынан алганда, кумарин-DABMI FRET спираль аралык эффективдүүлүгү колицин каналы үчүн кол чатыр моделине таянып, мембрана менен байланышканда төмөндөгөн.Канал доменинин жабык абалынын болжолдуу модели учурдагы жана мурда жарыяланган FRET маалыматтарынын негизинде иштелип чыккан.Модель 1-7 спиральдардын клеткадан тышкаркы тараптан сааттын жебеси боюнча тегерек жайгашуусун жана 8 жана 9 спиральдар менен түзүлгөн борбордук трансмембраналык чачтын айланасында 1, 6, 7 жана 10 спиральдардын мембраналар аралык бирикмесин сунуштайт.