Айланабызда катардагыдай көрүнгөнү менен, чындыгында унчукпай бизге чоң салым кошуп жаткан айтылбаган баатырлар көп.Протеиназа К - молекулярдык диагностика тармагындагы "көрсөтүлбөгөн баатыр", бирок тармактагы "чоң жана күчтүү" менен салыштырганда, протеиназа К ушунчалык төмөн болгондуктан, биз анын маанилүүлүгүн көптөн бери байкабай келгенбиз.Жаңы таажы эпидемиясынын чыгышы менен протеиназа Кга болгон суроо-талап өсүп, үйдөгү жана чет өлкөлөрдөн сунуш керектөөдөн алда канча артта калып, протеиназа К абдан маанилүү экенин баары капысынан түшүнүштү.
Протеиназа К кандай колдонулат
Протеиназа К - протеолиттик фермент активдүүлүгү бар сериндик протеаза жана чөйрөнүн кеңири диапазонунда (рН (4-12,5), жогорку туздуу буфер, 70°С жогорку температура ж.б.) активдүүлүгүн сактай алат.Мындан тышкары, протеиназа К активдүүлүгү SDS, мочевина, ЭДТА, гуанидин гидрохлориди, гуанидин изотиоцианат ж.б. тарабынан бөгөттөлбөйт, ошондой эле белгилүү бир өлчөмдөгү детергенттер К. протеиназанын активдүүлүгүн медициналык дарылоодо (вирустук жана микробдук дезинфекциялоодо) күчөтүшү мүмкүн. ), тамак-аш (эт жумшартуу), булгаары (чачты жумшартуу), шарап жасоо (спирттик тазалоо), аминокислоталарды даярдоо (деградацияланган жүнү), нуклеин кислотасын экстракциялоо, in situ гибриддештирүү ж.б., протеиназа К колдонмолору бар.Эң көп колдонулган колдонмо нуклеин кислотасын алуу болуп саналат.
Протеиназа К үлгүдөгү протеиндердин бардык түрлөрүн, анын ичинде нуклеиндик кислоталар менен тыгыз байланышта болгон гистондорду энзимолиздей алат, ошентип нуклеиндик кислоталар үлгүдөн бөлүнүп, экстракцияга бөлүнүп, экстракциянын жана тазалоонун кийинки кадамын жеңилдетет.Вирустук нуклеиндик кислотаны аныктоодо протеиназа К вирустун үлгүсүн алуу эритмесиндеги маанилүү компоненттердин бири болуп саналат.Протеиназа К вирустун кабык протеинди жарып, инактивациялай алат, бул ташуу жана аныктоо стадиясында коопсузраак;Мындан тышкары, протеиназа K RNase деградациясын жасай алат, вирустук РНКнын деградациясын алдын алат жана нуклеин кислотасын аныктоону жеңилдетет.
Протеиназанын түнкү атагы К
Илимий изилдөө тармагындабы же IVD тармагындабы, нуклеин кислотасын алуу эң негизги эксперимент, ошондуктан протеиназа К ар дайым абдан маанилүү болгон.Бирок, мурда протеиназа К анын ролуна караганда алда канча аз белгилүү болгон.Мунун чоң бөлүгү протеиназа К суроо-талап менен сунуш мамилеси абдан туруктуу болгон.Протеиназа К менен камсыз кылуу көйгөй жаратат деп ойлогон адамдар аз.
Жаңы таажы эпидемиясынын чыгышы менен нуклеин кислотасын текшерүүгө суроо-талап өстү.2020-жылдын июнь айынын акырына карата Кытай 90 миллионго жакын жаңы таажы сыноолорун аяктады жана бул сан дүйнөлүк масштабда андан да коркунучтуу.Нуклеин кислотасын экстракциялоо боюнча эксперименттерде протеиназа Кнын жумушчу концентрациясы 50-200 мкг/млге жакынды түзөт.Негизинен нуклеин кислотасынын үлгүсүн алуу үчүн болжол менен 100 мкг протеиназа К талап кылынат.Иш жүзүндө колдонууда, нуклеин кислотасын экстракциялоонун натыйжалуулугун жогорулатуу үчүн, көбүнчө протеиназа К көбөйгөн өлчөмдө колдонулат.Жаңы коронавирустун нуклеиндик кычкылдыгын аныктоо протеиназа К көп сандагы суроо-талапты алып келди.Протеиназа Кнын баштапкы суроо-талап жана сунуш балансы тез эле бузулуп, протеиназа К түн ичинде эпидемияны алдын алуу үчүн маанилүү материал болуп калды.
Протеиназаны өндүрүүдөгү кыйынчылыктар К
Эпидемиянын өнүгүшү менен протеиназа Кнын маанилүү баалуулугу эл тарабынан бааланса да, протеиназа К-нын өтө төмөн ачкычтуулугунан улам бир нече ата мекендик компаниялардын протеиназа К өндүрүшүнө тартылганы уят. протеиназа К өндүрүшүн түзүүнү каалайбыз Өндүрүш процессинде протеиназа К абдан өзгөчө бир белок экени аныкталган.Кыска убакыттын ичинде протеиназа К өндүрүшүнүн кубаттуулугун кеңейтүү өтө кыйын.
Протеиназа К-нын ири өндүрүшү төмөнкүдөй кыйынчылыктарга дуушар болот
1. Төмөн сөз
Протеиназа К көпчүлүк протеиндерди спецификалык эмес деградациялайт жана экспрессиялык кабыл алуучу клеткага олуттуу уулуулукту алып келиши мүмкүн.Демек, протеиназа К экспрессия деңгээли көбүнчө өтө төмөн.К протеиназаны жогорку экспрессиялоочу экспрессия системаларын жана штаммдарын скрининг жалпысынан узак циклди талап кылат.
2. Пигменттердин жана нуклеин кислоталарынын калдыктары
Чоң масштабдагы ачытуу пигменттин жана нуклеин кислотасынын калдыктарынын көп санын киргизет.Жөнөкөй тазалоо процесси менен бул кирлерди кетирүү кыйын, ал эми комплекстүү тазалоо чыгымды көбөйтөт жана калыбына келтирүү ылдамдыгын азайтат.
3. Туруксуздук
Протеиназа К жетишээрлик турукташпайт, ал өзүн ферменттей алат, коргоочу агентсиз аны 37°С узак убакытка туруктуу сактоо кыйын.
4. Жеңил жааган
Протеиназа К-нын тоңдурулуп кургатылган порошокту даярдоодо тоңдурулуп кургатылган порошоктун курамында протеиназа К-нын катуу курамы чоң болушун камсыз кылуу үчүн жогорку концентрацияда тоңдурулуп кургатылган коргоочу агент кошуу керек, бирок протеиназа К концентрациясы 20мг/мл жана андан жогору болсо, бул оңой агрегацияда чөкмө пайда болот, бул жогорку катуу мазмундагы протеиназа К-ны тоңдуруу менен кургатууда чоң кыйынчылыктарды алып келет.
5. Чоң инвестиция
Протеиназа К күчтүү протеаза активдүүлүгүнө ээ жана лабораторияда башка протеазаларды гидролиздей алат.Ошондуктан, протеиназа К изилдөө жана иштеп чыгуу жана өндүрүш үчүн адистештирилген өндүрүш аймактарын, жабдууларды жана персоналды талап кылат.
XD BIOCHEM протеиназа К эритмеси
XD BIOCHEM has a mature protein expression and purification platform, and has rich experience in the expression and purification of recombinant proteins and optimization of production processes. Through the rapid formation of a research and development team, the large-scale production process of proteinase K has been overcome. The monthly output of freeze-dried powder is more than 30 KG. The product has stable performance, high enzyme specific activity, and no host cytochrome and nucleic acid residues. Welcome to contact XD BIOCHEM Obtain a trial package (E-mail: sales@xdbiochem.com Tel: +86 513 81163739).
XD BIOCHEMдин техникалык чечимдери кирет
Көп нускалуу плазмиддик интеграцияны колдонуу менен экспрессия деңгээли 8г/л болгон жогорку экспрессиялык штаммдар тандалып алынат, бул протеиназа Кнын төмөнкү экспрессия деңгээлинин көйгөйүн жеңет;
Көп баскычтуу тазалоо процессин түзүү аркылуу протеиназа К-нын хост цитохромунун жана нуклеин кислотасынын калдыктары стандарттык мааниден төмөн ийгиликтүү алынып салынды;
Коргоочу буфердик формаларды жогорку өтүмдүү скрининг аркылуу 37°C протеиназа К туруктуу сактай ала турган буфер тандалды;
Скринингдик буферлер протеиназа К жогорку концентрацияларда оңой топтолуп, чөктүрүлөт деген көйгөйдү жеңет жана протеиназа Кнын жогорку катуу мазмунун тоңдуруу менен кургатуу үчүн негиз түзөт.
XD BIOCHEM протеиназа K үлгүсү
XD BIOCHEM протеиназа K туруктуулук тести: бөлмө температурасында 80 күндөн кийин активдүүлүктө олуттуу өзгөрүү болбойт
XD BIOCHEM протеиназа K туруктуулук тести: бөлмө температурасында 80 күндөн кийин активдүүлүктө олуттуу өзгөрүү болбойт
XD BIOCHEM протеиназа К жана атаандаш өнүмдөрдүн нуклеин кислотасын экстракциялоо эффектисин салыштыруу.Нуклеин кислотасын алуу процессинде тиешелүүлүгүнө жараша XD BIOCHEM жана атаандаш протеиназа К колдонулат.XD BIOCHEM протеиназа К экстракциянын эффективдүүлүгү жогору жана максаттуу гендин Ct мааниси төмөн.
Посттун убактысы: 31-дек 2021