Продукциялар

LecA (PA-IL) Pseudomonas aeruginosa тарабынан өндүрүлгөн цитотоксикалык лектин жана адгезин, ал гидрофобдук галактозиддерди жогорку өзгөчөлүк жана жакындык менен байланыштырат.lecA-egfp котормо синтезин жана биофильмдин клеткадан тышкаркы матрицанын иммуноблоттук анализин колдонуу менен биз lecA биофильмде өстүрүлгөн клеткаларда көрсөтүлөрүн көрсөтөбүз.Полистиролдо да, дат баспас болоттон да статикалык биофильмди анализдөөдө биофильмдин тереңдиги жана бетинин каптоосу lecA мутациясынын натыйжасында азайган жана LecA ашыкча өндүрүүчү PAO-P47 штаммында жакшырган.Болот купондорундагы lecA мутанты эмес, PAO-P47 штаммы менен биофильмдин үстүн каптоо да изопропил-бета-D-тиогалактозиддин (IPTG) же п-нитрофенил-альфа-D-галактозиддин (IPTG) катышуусунда өсүү менен тоскоол болгон. NPG).Мындан тышкары, бул гидрофобдук галактозиддер жок болгон учурда пайда болгон жетилген жапайы типтеги биофильмдер IPTG кошуу менен таркатылышы мүмкүн.Ал эми, P. aeruginosa LecB (PA-IIL) lecti n үчүн жогорку жакындыгы бар p-nitrophenyl-alpha-L-fucose (NPF) кошуу биофильмдердин пайда же чачырап эч кандай таасирин тийгизген.P. aeruginosa PAO1дин планктондук өсүшү IPTG, NPG же NPFтин болушуна таасирин тийгизген эмес, ошондой эле штамм бул канттарды көмүртек булагы катары пайдалана алган эмес, бул биофильмдин пайда болушуна байкалган таасирлер LecA-лиганддын атаандаштыкка жөндөмдүү бөгөт коюусунан улам болгон дегенди билдирет. байлоо.Окшош натыйжалар, ошондой эле LecA ар кандай экологиялык шарттарда P. aeruginosa biofilm архитектурасына өбөлгө түзөт деп сунуш, болот талондор боюнча динамикалык агым шарттарында өстүрүлгөн biofilms үчүн алынган.

Арабидопсис өсүмдүктөрүнүн жалбырактарында ксилоглюкан олигосахариддеринин каптал чынжырынан т-фукозил калдыктарын чыгарууга жөндөмдүү альфа-L-фукосидаза (EC 3.2.1.51) табылган.Мындан тышкары, SDS-PAGEде бир тилке түзүү үчүн капуста (Brassica oleracea) жалбырактарынан окшош субстрат өзгөчөлүгү менен альфа-L-фукосидаза тазаланды.Бул протеиндик тилкеден эки пептиддик ырааттуулук алынган жана алар биз AtFXG1 деп атаган альфа-фукосидазаны коддоочу Арабидопсис генин аныктоо үчүн колдонулган.Мындан тышкары, белгилүү alpha-L-фукосидазалар менен гомологиясы бар Arabidopsis гени да табылды жана биз аны AtFUC1 деп атоону сунуш кылдык.AtFXG1 жана ATFUC1 экөө тең гетерологиялык түрдө Pichia пасторис клеткаларында жана маданий чөйрөдө бөлүнүп чыккан альфа-L-фукосидаза иш-аракеттеринде чагылдырылган.AtFXG1 тарабынан коддолгон альфа-L-фукосидаза ксилоглюкан XXFGден алынган олигосахариддерге, ошондой эле 2'-фукозил-лактитолго каршы активдүү болгон, бирок p-нитрофенил-альфа-L-фукопиранозидге каршы эмес.Бирок, AtFUC1 гетерологиялык түрдө 2'-фукозил-лактитолго каршы гана активдүү болгон.Ошентип, биринчи ксилоглюкан метаболизмине байланыштуу болушу керек.