Продукциялар

Флуоресцеин жана флуоресцеин метил эфиринин моногалактопиранозиддери: синтез, биотнилденген β-галактозидаза менен ферменттик гидролиз жана трансляциялык диффузия коэффициентин аныктоо

Флуоресцеин моногликозиддери (d-галактопиранозид (FMG) жана d-глюкопиранозид) жана алардын метил эфири (MFMG) ацетобромоглюкоза/галактоза жана флуоресцеин метил эфиринен жакшы түшүмдүүлүк менен даярдалган.Галакто туундуларынын ферментативдик гидролиздик эксперименттери (биотинилденген β-галактозидазаны колдонуу менен) жүргүзүлдү жана кинетикалык параметрлери эсептелди.Гидролиз учурунда флуоресценция интенсивдүүлүгүнүн 15-20 эсе жогорулашы байкалган.Кыска убакытта жана субстраттын аз концентрациясында флуоресценциянын сызыктуу көбөйүшү байкалган, бул кошулмаларды галактозидазалар үчүн пайдалуу жана сезгич зоналар кылат.MFMG үчүн Михаэлис-Ментен константасынын (Км) чоңдугу FMGге караганда жогору, бул флюорогендик субстраттын мүмкүн болгон конформациялык өзгөрүшүн сунуштайт.FMG менен биотинилденген β-Гал үчүн Km мааниси жергиликтүү ферментке караганда төмөн.Бул байкоо жергиликтүү ферментке салыштырмалуу биотинилденген ферменттин субстраттык жакындыгын көрсөтөт.Флуоресценттик корреляциялык спектроскопияны колдонуу менен флюорогендик субстраттар үчүн да, эки продукт үчүн тең трансляциялык диффузиянын коэффициенттери өлчөнгөн.Фторогендик субстраттар жана ферменттик гидролиз продуктулары үчүн трансляциялык диффузия коэффициенттери 3,5–4,5 × 10−10 м2 с−1 диапазонунда окшош болуп өлчөнгөн.Ошентип, субстрат менен продуктунун котормо кыймылдуулугундагы айырмачылыктан улам ферменттик кинетиканын жакшырышы же артта калышы анча деле айкын эмес.