Продукциялар

Акыркы кездери суроолор тез-тез көтөрүлүп келет: 1. Эмне үчүн ONPG тести лактозанын кечигүүсүн айырмалоо үчүн колдонулушу мүмкүн?2. Эмне үчүн улуттук стандартта ONPG тести үчүн 3% натрий хлориди трисахарид темирин (же трисахарид темирин) колдонуу зарыл деп жазылган?3. Vibrio parahaemolyticus үчүн OPNG тестин жүргүзүүдө эмне үчүн толуолду стандартка ылайык тамчылатып кошуу керек?Функциясы кандай?

Биздин компания көптөгөн маалыматтарды карап чыгып, аларды жалпылап, төмөндө сиз менен бөлүштү:

Принцип: ONPG кытай аталышы o-nitrobenzene-β-D-galactopyranoside болуп саналат.ONPG галактозага жана сары о-нитрофенолго (ONP) β-галактозидаза аркылуу гидролиздениши мүмкүн, ошондуктан β-галактозидазанын активдүүлүгүн маданий чөйрөнүн түсүнүн өзгөрүшү менен аныктоого болот.

Лактоза көпчүлүк микроорганизмдер аныкташы керек болгон кант.Анын зат алмашуусу эки ферментти талап кылат, бири клетканын өтүшү, лактоза пермеазанын таасири астында клеткаларга кирет;экинчиси - β-галактозидаза, ал лактозаны галактозага гидролиздейт.Лактоза жана глюкоза.β-Галактозидаза ONPGга түздөн-түз таасир эте алат, аны галактозага жана сары о-нитрофенолго (ONP) гидролиздөө.Аны 24 сааттын ичинде, атүгүл лактозаны кечиктирген ферментер менен жасоого болот.Ошондуктан, ал агардын кыйшаюусунан 1 маданиятын терип, аны 36°C 1-3 саат жана 24 саат бою толук айланага эмдөөнүн байкоо натыйжаларын түшүндүрөт.β-галактозидаза пайда болсо, 1-3 саатта сарыга айланат, эгерде андай фермент жок болсо 24 саатта түсү өзгөрбөйт.

Жогорудагы эки фермент боюнча микроорганизмдерди төмөнкү категорияларга бөлүүгө болот:

1 лактозаны ачытуучу (18-24 саат) бактериялар пермеаза жана β-галактозидаза P+G+;

2 Кечигип калган лактоза ферментерлери (24 сааттан ашык убакытты талап кылган), пермеазы жок, бирок галактозидазага ээ: P- G+.

3 Пермеазасы да, галактозидазасы да жок лактозалуу эмес ферментер: P- G-.

ONPG тести лактоза-кеч ачуучу бактерияларды (P-G+) ачытпаган лактоза бактерияларынан (PG-) айырмалоо үчүн колдонулушу мүмкүн, мисалы:

1 Кеч лактоза ферментерлерин (P- G+) лактоза эмес ферментерлерден (P- G-) айырмалаңыз.

(а) Citrobacter (+) жана Salmonella arizonae (+) Сальмонелладан (-).

(б) Шигелла соннеиден (-) ичеги таякчасы (+).

Эмне үчүн ONPG анализи 3% натрий хлориди темир трисахаридине (темир трисахаридине) түнкү маданиятты колдонуу менен аткарылган?Биздин компания көптөгөн маалыматтарды талкуулады, бирок так билдирүү жок.FDA веб-сайтында гана мындай деп жазылган: "Сынактан өтүүчү культураларды үч эселенген канттуу темир агарга сайып, 37°Cде (же башка тиешелүү температурада) 18 саат бою инкубациялаңыз. 1.0 камтыган азыктандыруучу (же башка) агар % лактоза да колдонулушу мүмкүн."дегенди билдирет: сыноо бактериялары трисахарид темир чөйрөсүнө эмделди жана 37°C 18 саат бою өстүрүлдү.1% лактоза камтыган аш болумдуу агар ийилген (же башка) чөйрө да кабыл алынат.Ошондуктан, трисахарид темир чөйрөсү лактозаны камтыйт деген жыйынтыкка келет.Түн ичинде өскөндөн кийин, бактериялар жакшы активдүү β-галактозидазаны чыгарышты.Мындай бактерияларды колдонуу менен, ONPG β-галактозидаза менен тезирээк ыдыратылышы мүмкүн.Эксперименттик көрүнүш тезирээк жана жакшыраак көрүнөт.Мындан тышкары, толуолду тамчылатып кошуу жана 5 мүнөт суу ваннасы β-галактозидазаны толук чыгаруу үчүн.